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发光底物HRP有哪些使用要点?

发布时间: 2022-09-21  点击次数: 58次
  发光底物HRP基于增强型化学发光底物研制而成,在HRP的催化下发生化学反应而发光,可用于检测人血清或血浆中的病毒表面抗原。其高灵敏度能够检测低皮克级别的抗原,发光信号强烈持久,可以使用微孔板式化学发光检测仪进行测定。
 
  发光底物HRP是一种高灵敏度的增强型化学发光底物试剂,采用发光底物系统,并对成份进行了优化。产品背景低,稳定性好,信号的灵敏度及强度高,发光时间持久。比普通ECL试剂敏感度高数十倍。用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶HRP的抗体及其关联的抗原。可以灵敏地检测出目的蛋白的存在。它由辣根过氧化物酶(HRP)催化发生化学反应,发出荧光,可对X光胶片曝光,也可直接进行检测或者荧光CCD扫描。
 
  发光底物HRP的使用要点:
  •ECLA液和B液在汲取过程中必须要更换枪头,A液和B液相互污染后会导致A液或B液逐渐失效,影响后续的使用效果。
 
  •即用即配,用多少配多少,混合配好的ECL工作液可以在4度避光稳定保存7天。
 
  •为避免产生高背景,应全程佩戴手套处理转印膜。
 
  •使用平头镊子夹取转印膜,避免膜撕裂或留下夹痕。
 
  •切勿在任何封闭液或洗涤液中添加抑制剂,会抑制HRP活性。
 
  •根据蛋白丰度不同曝光时间可能是数秒至数小时。曝光时间过长会使背景加深,曝光不足会导致条带模糊。
 
  •如果曝光后条带不佳,可用洗膜缓冲液或者抗体剥离液Reblot洗膜,重新孵育二抗,然后重新用ECL发光和曝光。
 
  •使用高质量保鲜膜。
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