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福尔根(Feulgen)染色液

福尔根(Feulgen)染色液

简要描述:货  号:FXC0720
名  称:福尔根(Feulgen)染色液
规  格:100ml
价  格:280

产品型号: FXC0720

所属分类:染色液

更新时间:2016-12-05

厂商性质:经销商

详情先容

福尔根(Feulgen)染色液说明书

 

福尔根(Feulgen)染色液反应原理:

DNA 经酸(1mol/L HCl)水解后,嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键被打开,并且使脱氧核糖与磷酸间的磷酯键断开,在脱氧核糖的一端形成游离的醛基。醛基在原位与 Schiff 试剂结合,形成紫红色化合物,使细胞内含有 DNA的部位呈紫红色阳性反应。紫红色的产生是因为反应产物的分子内有醌基(醌基是一个具有颜色的发色团),所以含有 DNA 的部位,呈紫红色。而RNA用此法处理后则分解。

       试剂组成

规格

保存条件

Schiff试剂

100ml

2-8℃避光

重亚硫酸盐溶液

100ml

2-8℃避光

保质期:2-8℃避光6个月。

福尔根(Feulgen)染色液操作步骤

本染色液采用经典方法配制,染色方法可参考文献或者实验室留传下来的方法,或者参考下面的方法。

处理准备标本,同时准备60℃的1M的盐酸溶液。

1.切片脱蜡入水(洋葱表皮等类似标本,固定,梯度乙醇后入水)。

2.切片放入60℃的 1M的盐酸溶液中约5-15分钟(水解时间因标本及固定液不同而有差异,)。

3.滴加或者浸入Schiff试剂,反应30-60分钟(此步为避光反正,在通风处,用完试剂请马上盖严)。

4.吸干或者甩去Schiff试剂(如果不用重亚硫酸盐溶液洗,此步可直入水冲洗)

5.用重亚硫酸盐溶液清洗,,用完盖严(一般此步可省,直接用蒸馏水洗)。

6.在蒸馏水中充分冲洗。

7.封片(要保存染色结果,请经酒精脱水,二甲苯透明并封片)。 如果只简单的立即观察,可直接在有少量水的情况下压片。显微镜观察。

福尔根(Feulgen)染色液注意事项

1.此试剂为接到订单后我企业再配制,保质期一般为6个月。但因为经常开盖等原因造成SO2流失,试剂保质期会变短,如果染色结果不佳,可适当加入少量重亚硫酸钠(钾),加入量一般为0.1g/L

2.虽然Feulgen法是DNA的特异染色方法,但如果延长水解时间并在室温下进行反应, Schiff试剂也与醛、酮、醇和缩醛磷脂起反应,因此用Feulgen法检测DNA时必须严格控制盐酸水解的时间和温度。为减少假阳性和非特异性染色必须做对照实验。

3.由于Schiff试剂能与醛基结合,故不能用含醛的固定液固定组织,常用Carnoy固定液。Bouin液不适用于Feulgen反应,因为固定液中含较多的酸,可将DNA水解,影响染色反应。



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