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SDS-PAGE蛋白电泳套装现货供应

SDS-PAGE蛋白电泳套装现货供应

简要描述:货  号:P0500
名  称:SDS-PAGE蛋白电泳套装现货供应
规  格:50T
价  格:460.00

产品型号:

所属分类:其他自产即用试剂

更新时间:2016-12-15

厂商性质:经销商

详情先容

SDS-PAGE蛋白电泳套装现货供应

 

名称

规格

保存条件

5×蛋白上样缓冲液(含DTT

1ml

-20

Tris-甘氨酸蛋白电泳缓冲液

一包(10L

RT

30%丙烯酰胺(29:1)

100mlX2

2-8

1.5mol/LTris(pH8.8)

100mlX2

RT

1.0mol/LTris(pH6.8)

60ml

RT

过硫酸铵干粉

2g

RT

10%SDS

10ml

RT

TEMED

1.5ml

RT

说明书

一份

一份

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

产品概况

本企业提供的蛋白电泳套装包含凝胶制备,蛋白上样缓冲液及蛋白电泳上样缓冲液。

本企业生产的SDS-PAGE蛋白电泳套装是按照经典方法配制而成。本套装根据电泳体系的大小,可进行约50次左右。

SDS-PAGE蛋白电泳套装现货供应

使用说明:

一,前期工作:蛋白提取及定量。

二,蛋白上样液的制备:蛋白上样缓冲液解冻,轻轻混匀,按4体积蛋白样品加入一体积的5×蛋白上样缓冲液,混匀,沸水中水浴5分钟。

三,电泳液的配制:将一包电泳液干粉全部倒入1L-2L的烧柄中,加一定量的水溶解成2L配成5×Tris-甘氨酸蛋白电泳缓冲液,用前再稀释5倍或者先配成1L成为10×Tris-甘氨酸蛋白电泳缓冲液,用前再稀释10倍。

四,取10-15支1.5ml离心管,将过硫酸铵干粉分装成100mg/支,标记好备用。

五,凝胶制备:

1,  取一支称好的100mg过硫酸铵干粉,加入1ml蒸馏水,混匀,此配好的10%过硫酸铵溶液2-8度可保存一周,一周后请用新的。洗干净电泳玻璃板,夹好。

2,  根据目标蛋白分子量大小,选取凝胶浓度,按下表配制。先配分离胶,再配浓缩胶。

 

 

分离胶15%

分离胶12%

分离胶10%

分离胶8%

浓缩胶(5%)

总体积

10ml

10ml

10ml

10ml

5ml

30%丙烯酰胺(29:1)

5ml

4ml

3.3ml

2.7ml

0.83ml

1M Tris-HCL (PH6.8)

0

0

0

0

0.625ml

1.5M Tris-HCL(PH8.8)

2.5ml

2.5ml

2.5ml

2.5ml

0

10%SDS

100ul

100ul

100ul

100ul

50ul

ddH2O

2.3ml

3.3ml

4.0ml

4.6ml

3.42ml

10%过硫酸铵

100ul

100ul

100ul

100ul

75ul

TEMED

10ul

10ul

10ul

10ul

7.5ul

 

 

 

 

 

 

 

 

注意:

1,TEMED和10%过硫酸铵zui后加,在加入前需混匀前面所加试剂。10%过硫酸铵在4℃有效期为一周,TEMED易挥发,使用后请盖紧瓶盖。在常温下胶30分钟内可以凝固,如温度过低,可放37℃温箱凝固。灌完分离胶后,轻轻的加1ml ddH2O封上层,胶凝固后可见到分界线。灌浓缩胶前,先倾去水层,再用吸纸吸干。浓缩胶灌好后立即插入梳子。浓缩胶凝固后,放入电泳液中(让电泳液漫过加样孔),轻轻的拨出梳子,可防加样孔变形。

2,配制量可按上表等比加减。如果所用胶浓度与上面不同,可自行调整,主要是调整30%丙烯酰胺的量(需要浓度×总体积/30%),zui后用水补足总体积。

六,上样,电泳,一般是浓缩胶80V,分离胶120V恒压,等溴酚兰电泳到合适的位置,结束电泳,染色或者进行下一步实验。

 附:SDS-PAGE分离胶的浓度与*分离范围

SDS-PAGE分离胶浓度

*分离范围

6%胶

57-212kD

8%胶

36-94kD

10%胶

20-80kD

12%胶

12-60kD

15%胶

10-43kD


配制6%的PAGE分离胶

成分

所需各成分的体积(毫升)

凝胶体积51015

20

25

30

蒸馏水

2.6

5.3

7.9

10.6

13.2

15.9

30%丙烯酰胺混合液

1.0

2.0

3.0

4.0

5

6.0

1.5mol/L Tris(pH8.8)

1.3

2.5

3.8

5.0

6.3

7.5

10%SDS

0.05

0.1

0.15

0.2

0.25

0.3

10%过硫酸铵0.05

0.1

0.15

0.2

0.25

0.3

TEMED

0.004

0.008

0.012

0.016

0.02

0.024


配制8%的PAGE分离胶

成分

所需各成分的体积(毫升)

凝胶体积

5

10

15

20

25

30

蒸馏水

2.3

4.6

6.99.3

11.5

13.9

30%丙烯酰胺混合液

1.3

2.7

4.0

5.3

6.7

8.0

1.5mol/L Tris(pH8.8)1.3

2.5

3.8

5.0

6.3

7.5

10%SDS

0.05

0.1

0.15

0.2

0.25

0.3

10%过硫酸铵

0.05

0.1

0.15

0.2

0.25

0.3

TEMED

0.003

0.006

0.009

0.012

0.015

0.018


配制10%的PAGE分离胶

成分

所需各成分的体积(毫升)

凝胶体积

5

10

1520

25

30

蒸馏水1.9

4.0

5.97.9

9.9

11.9

30%丙烯酰胺混合液

1.7

3.3

5.0

6.7

8.3

10.0

1.5mol/L Tris(pH8.8)

1.3

2.5

3.8

5.0

6.3

7.5

10%SDS0.05

0.1

0.15

0.2

0.25

0.3

10%过硫酸铵

0.05

0.1

0.15

0.2

0.25

0.3

TEMED

0.002

0.004

0.006

0.008

0.01

0.012


配制12%的PAGE分离胶

成分

所需各成分的体积(毫升)

凝胶体积

5

10

15

2025

30

蒸馏水1.63.3

4.9

6.6

8.2

9.9

30%丙烯酰胺混合液

2.0

4.0

6.0

8.0

10.0

12.0

1.5mol/L Tris(pH8.8)1.3

2.5

3.8

5.0

6.3

7.5

10%SDS

0.05

0.1

0.015

0.2

0.25

0.3

10%过硫酸铵

0.05

0.1

0.015

0.2

0.25

0.3

TEMED

0.002

0.004

0.006

0.008

0.01

0.012


配制15%的PAGE分离胶

成分

所需各成分的体积(毫升)

凝胶体积

5

10

15

20

25

30

蒸馏水

1.1

2.33.44.6

5.7

6.9
30%丙烯酰胺混合液

2.5

5.0

7.5

10.0

12.5

15.0

1.5mol/L Tris(pH8.8)

1.3

2.5

3.8

5.0

6.3

7.5
10%SDS

0.05

0.1

0.15

0.2

0.25

0.3

10%过硫酸铵

0.05

0.1

0.15

0.2

0.25

0.3

TEMED

0.002

0.004

0.006

0.008

0.001

0.012


3. 按照如下表格配制SDS-PAGE的浓缩胶(也称上层胶、积层胶或堆积胶)
                    
                                      配制不同体积的浓缩胶

成分

所需各成分的体积(毫升)

凝胶体积

2

3

4

5

6

8

蒸馏水

1.4

2.1

2.7

3.4

4.1

5.5

30%丙烯酰胺混合液

0.33

0.5

0.67

0.83

1.0

1.3

1.0mol/L Tris(pH6.8)

0.25

0.38

0.5

0.63

0.75

1.0

10%SDS

0.02

0.03

0.04

0.05

0.06

0.08

10%过硫酸铵

0.02

0.03

0.04

0.05

0.06

0.08

TEMED

0.002

0.003

0.004

0.005

0.006

0.008

 

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