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Lowry法蛋白浓度测定试剂盒现货

Lowry法蛋白浓度测定试剂盒现货

简要描述:货  号:P0140
名  称:Lowry法蛋白浓度测定试剂盒现货
规  格:1000微孔
价  格:280.00

产品型号:

所属分类:其他自产即用试剂

更新时间:2016-12-16

厂商性质:经销商

详情先容

Lowry法蛋白浓度测定试剂盒现货

Lowry法蛋白浓度测定试剂盒
          

试剂盒组成

包装(1000微孔)

保存

Folin酚甲试剂A

100ml×2

2-8℃

Folin酚甲试剂B

5ml

2-8℃

Folin酚乙试剂(1N)

20ml

2-8℃

PBS稀释液

30ml

2-8℃

BSA蛋白标准 (5mg/ml BSA)

1ml

-20℃

 

 本试剂盒自订购之日起一年内有效。本试剂盒用于酶标板或者200ul比色皿时可做1000孔。当使用2ml比色皿时可做100孔,如果是1ml比色皿时可做200孔。 

Lowry法蛋白浓度测定试剂盒现货

 

产品概况

Folin-酚试剂法包括两步反应:*步是在碱性条件下,蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物;第二步是此络合物将Folin试剂还原,产生深蓝色,颜色深浅与蛋白质含量成正比。定量范围为5~100μg/ml蛋白质。Folin试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起,因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物均有干扰作用。此外,不同蛋白质因酪氨酸、色氨酸含量不同而使显色强度稍有不同。

使用说明

一,酶标仪法

1.         根据需要量,将Folin酚甲试剂A和Folin酚甲试剂B按50:1混合,其有效期为24小时,过期失效。

2.         稀释标准品:取10微升BSA标准品用PBS稀释至100微升(标准品一般可用PBS稀释),使终浓度为0.5mg/ml。将标准品按0, 2, 4,6,8, 12, 16, 20微升加到96孔板的蛋白标准品孔中,加PBS补足到20微升。

3.         将样品作适当稀释(多做几个梯度,如作2倍、4倍、8倍稀释),加20微升到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差,标准线前面的点可能不很准确,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。

4.         将配好的Folin酚甲试剂每孔加入200微升,轻轻震动,混匀,室温放置10分钟。

5.         各孔加入20微升Folin酚乙试剂,迅速混匀,37℃放置30分钟。用酶标仪测定A650,根据标准曲线计算出蛋白浓度。

6.         使用温箱孵育时,应注意防止因水粉蒸发影响检测结果。

二,分光光度计法

如没有酶标仪,可用分光光度计在离心管中混匀后加入比色皿中比色。步骤如下:

1.  根据需要量,将Folin酚甲试剂A和Folin酚甲试剂B按50:1混合,其有效期为24小时,过期失效。

2.  稀释标准品:取10微升BSA标准品用PBS稀释至100微升(标准品一般可用PBS稀释),使终浓度为0.5mg/ml。

3.  取八支(或者更多)5ml离心管,标让号,按下表加入试剂。

离心管号

1

2

3

4

5

6

7(样品管1

8(样品管2

9(样品管3

标准蛋白BSA

0

40ul

80ul

120ul

160ul

200ul

200ul适当稀释的样品1

200ul适当稀释的样品2

……

PBS

200ul

160ul

120ul

80ul

40ul

0

0

0

0

Folin酚甲试剂

2ml

2ml

2ml

2ml

2ml

2ml

2ml

2ml

2ml

混匀,室温放置10分钟

Folin酚乙试剂

200ul

200ul

200ul

200ul

200ul

200ul

200ul

200ul

200ul

4.混匀,37℃放置30分钟。用分光光度计测定A650.



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